Электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ) имеет широкий спектр применения в биологических и биохимических исследованиях, главным образом в следующих аспектах:
Разделение и идентификация белков : PAGE разделяет образцы белков под действием электрического поля, разделяет их по размеру и разнице зарядов белков, а затем анализирует их. Этот метод можно использовать для разделения и идентификации различных белковых компонентов в образцах белков, а также для анализа молекулярной массы и зарядового состояния белков.
Анализ молекулярной массы и зарядового состояния белка: PAGE может анализировать молекулярную массу и зарядовое состояние белков в зависимости от скорости их миграции в электрическом поле. Крупномолекулярные белки мигрируют медленно, мелкомолекулярные белки мигрируют быстро, положительно заряженные белки мигрируют к катоду, а отрицательно заряженные белки мигрируют к аноду.
Обнаружение чистоты и содержания белка : PAGE в сочетании с окрашиванием или другими методами обнаружения может визуализировать полосы белка и выполнять количественный анализ. Этот метод можно использовать для определения чистоты и содержания белка.
Дальнейшая идентификация и количественная оценка в сочетании с другими аналитическими методами: PAGE можно комбинировать с другими аналитическими методами, такими как масс-спектрометрия, для дальнейшей идентификации и количественного определения разделенных белков. Это делает PAGE ценным в исследованиях протеомики.
Применение SDS-PAGE и Native-PAGE: В зависимости от цели анализа PAGE можно проводить в денатурирующих или не-денатурирующих условиях. SDS-PAGE устраняет структурные и зарядовые эффекты белков посредством денатурационной обработки, позволяя разделять их только на основе молекулярной массы; в то время как Native-PAGE сохраняет структуру белков более высокого-порядка и в основном используется для анализа нативного состояния и взаимодействий белков